4-ਨਾਈਟ੍ਰੋਫਿਨਾਇਲ ਬੀਟਾ-ਡੀ-ਗੈਲੈਕਟੋਪੀਰਾਨੋਸਾਈਡ CAS:200422-18-0

ਪ੍ਰਭਾਵ: ONPG ਇੱਕ ਸਬਸਟਰੇਟ ਹੈ ਜੋ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ β-galactosidase ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਅਤੇ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਜਦੋਂ β-galactosidase ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਮੌਜੂਦ ਅਤੇ ਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਇਹ ONPG ਨੂੰ ਦੋ ਉਤਪਾਦਾਂ ਵਿੱਚ ਵੰਡਦਾ ਹੈ: ਓ-ਨਾਈਟ੍ਰੋਫੇਨੋਲ ਅਤੇ ਇੱਕ ਗਲੈਕਟੋਜ਼ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵ।ਓ-ਨਾਈਟ੍ਰੋਫੇਨੋਲ ਦੀ ਮੁਕਤੀ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਪੀਲੇ ਰੰਗ ਦੀ ਤਬਦੀਲੀ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਜਿਸ ਨੂੰ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਮਾਪਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।

ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ: ONPG ਕੋਲ ਅਣੂ ਜੀਵ ਵਿਗਿਆਨ ਅਤੇ ਬਾਇਓਕੈਮਿਸਟਰੀ ਖੋਜ ਵਿੱਚ ਕਈ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ ਹਨ:

β-galactosidase ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਾ ਨਿਰਧਾਰਨ: ONPG ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ β-galactosidase ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਮਾਪਣ ਅਤੇ ਮਾਪਣ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਓ-ਨਾਈਟ੍ਰੋਫੇਨੋਲ ਗਠਨ ਦੀ ਦਰ, ਜੋ ਕਿ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦੇ ਸਿੱਧੇ ਅਨੁਪਾਤਕ ਹੈ, ਨੂੰ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਫੋਟੋਮੈਟ੍ਰਿਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਮਾਪਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।

ਜੀਨ ਸਮੀਕਰਨ ਅਤੇ ਨਿਯਮ: ONPG ਅਕਸਰ ਜੀਨ ਸਮੀਕਰਨ ਅਤੇ ਰੈਗੂਲੇਸ਼ਨ ਅਧਿਐਨਾਂ ਨਾਲ ਸਬੰਧਤ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਵਿੱਚ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਖਾਸ ਪ੍ਰਮੋਟਰਾਂ ਦੇ ਨਿਯੰਤਰਣ ਅਧੀਨ ਜੀਨਾਂ ਦੇ ਪ੍ਰਗਟਾਵੇ ਦਾ ਅਧਿਐਨ ਕਰਨ ਲਈ ਇਹ ਅਕਸਰ ਫਿਊਜ਼ਨ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਸੈਸ ਵਿੱਚ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤੀ ਜਾਂਦੀ ਲੈਕਜ਼ੈਡ ਫਿਊਜ਼ਨ ਪ੍ਰਣਾਲੀ।ONPG ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਮਾਪੀ ਗਈ ਬੀਟਾ-ਗੈਲੈਕਟੋਸੀਡੇਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਜੀਨ ਸਮੀਕਰਨ ਦੇ ਪੱਧਰ ਦੀ ਸੂਝ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦੀ ਹੈ।

β-galactosidase ਗਤੀਵਿਧੀ ਲਈ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ: ONPG ਨੂੰ LacZ ਜੀਨ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਅਤੇ ਕਾਰਜਕੁਸ਼ਲਤਾ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕਰਨ ਲਈ ਰੀਕੌਂਬੀਨੈਂਟ ਡੀਐਨਏ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਕਲੋਰਮੈਟ੍ਰਿਕ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਵਿਧੀ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜੋ β-galactosidase ਨੂੰ ਏਨਕੋਡ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਇਹ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਵਿਧੀ ਉਹਨਾਂ ਕਲੋਨਾਂ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਮਦਦ ਕਰਦੀ ਹੈ ਜਿਹਨਾਂ ਵਿੱਚ ਦਿਲਚਸਪੀ ਦਾ ਜੀਨ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।

ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਕੈਨੇਟਿਕਸ ਅਧਿਐਨ: ONPG β-galactosidase ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਦੇ ਗਤੀ ਵਿਗਿਆਨ ਦਾ ਅਧਿਐਨ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਵੀ ਲਾਭਦਾਇਕ ਹੈ।ਵੱਖ-ਵੱਖ ਸਬਸਟਰੇਟ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ ਐਂਜ਼ਾਈਮ-ਸਬਸਟਰੇਟ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੀ ਦਰ ਨੂੰ ਮਾਪ ਕੇ, ਮਾਈਕਲਿਸ-ਮੇਂਟੇਨ ਸਥਿਰਾਂਕ (ਕਿ.ਮੀ.) ਅਤੇ ਅਧਿਕਤਮ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦਰਾਂ (Vmax) ਵਰਗੇ ਗਤੀਸ਼ੀਲ ਮਾਪਦੰਡਾਂ ਨੂੰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨਾ ਸੰਭਵ ਹੈ।