4-ਨਾਈਟ੍ਰੋਫਿਨਾਇਲ ਬੀਟਾ-ਡੀ-ਗਲੈਕਟੋਪਾਈਰਾਨੋਸਾਈਡ CAS:200422-18-0

ਪ੍ਰਭਾਵ: ONPG ਇੱਕ ਸਬਸਟਰੇਟ ਹੈ ਜੋ ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ β-galactosidase ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਅਤੇ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਜਦੋਂ β-galactosidase ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਮੌਜੂਦ ਅਤੇ ਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਇਹ ONPG ਨੂੰ ਦੋ ਉਤਪਾਦਾਂ ਵਿੱਚ ਵੰਡਦਾ ਹੈ: o-nitrophenol ਅਤੇ ਇੱਕ galactose ਡੈਰੀਵੇਟਿਵ। o-nitrophenol ਦੀ ਰਿਹਾਈ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਇੱਕ ਪੀਲਾ ਰੰਗ ਬਦਲ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜਿਸਨੂੰ ਇੱਕ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਮਾਪਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।

ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ: ONPG ਦੇ ਅਣੂ ਜੀਵ ਵਿਗਿਆਨ ਅਤੇ ਜੀਵ-ਰਸਾਇਣ ਵਿਗਿਆਨ ਖੋਜ ਵਿੱਚ ਕਈ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ ਹਨ:

β-galactosidase ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਾ ਨਿਰਧਾਰਨ: ONPG ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ β-galactosidase ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਮਾਪਣ ਅਤੇ ਮਾਤਰਾ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਓ-ਨਾਈਟ੍ਰੋਫੇਨੋਲ ਗਠਨ ਦੀ ਦਰ, ਜੋ ਕਿ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦੇ ਸਿੱਧੇ ਅਨੁਪਾਤੀ ਹੈ, ਨੂੰ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਫੋਟੋਮੈਟ੍ਰਿਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਮਾਪਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।

ਜੀਨ ਪ੍ਰਗਟਾਵੇ ਅਤੇ ਨਿਯਮਨ: ONPG ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਅਕਸਰ ਜੀਨ ਪ੍ਰਗਟਾਵੇ ਅਤੇ ਨਿਯਮਨ ਅਧਿਐਨਾਂ ਨਾਲ ਸਬੰਧਤ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਵਿੱਚ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ। ਇਹ ਅਕਸਰ ਫਿਊਜ਼ਨ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਸੈਸ ਵਿੱਚ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤਿਆ ਜਾਣ ਵਾਲਾ lacZ ਫਿਊਜ਼ਨ ਸਿਸਟਮ, ਖਾਸ ਪ੍ਰਮੋਟਰਾਂ ਦੇ ਨਿਯੰਤਰਣ ਅਧੀਨ ਜੀਨਾਂ ਦੀ ਪ੍ਰਗਟਾਵੇ ਦਾ ਅਧਿਐਨ ਕਰਨ ਲਈ। ONPG ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਮਾਪੀ ਗਈ ਬੀਟਾ-ਗੈਲੈਕਟੋਸੀਡੇਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਜੀਨ ਪ੍ਰਗਟਾਵੇ ਦੇ ਪੱਧਰ ਵਿੱਚ ਸੂਝ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦੀ ਹੈ।

β-galactosidase ਗਤੀਵਿਧੀ ਲਈ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ: ONPG ਨੂੰ ਰੀਕੌਂਬੀਨੈਂਟ DNA ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਕਲੋਰੀਮੈਟ੍ਰਿਕ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਵਿਧੀ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ ਤਾਂ ਜੋ LacZ ਜੀਨ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਅਤੇ ਕਾਰਜਸ਼ੀਲਤਾ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕੇ, ਜੋ β-galactosidase ਨੂੰ ਏਨਕੋਡ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਇਹ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਵਿਧੀ ਉਹਨਾਂ ਕਲੋਨਾਂ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਮਦਦ ਕਰਦੀ ਹੈ ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚ ਦਿਲਚਸਪੀ ਵਾਲਾ ਜੀਨ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।

ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀ ਵਿਗਿਆਨ ਅਧਿਐਨ: ONPG β-galactosidase ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੇ ਗਤੀ ਵਿਗਿਆਨ ਦਾ ਅਧਿਐਨ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਵੀ ਲਾਭਦਾਇਕ ਹੈ। ਵੱਖ-ਵੱਖ ਸਬਸਟਰੇਟ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ-ਸਬਸਟਰੇਟ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੀ ਦਰ ਨੂੰ ਮਾਪ ਕੇ, ਮਾਈਕਲਿਸ-ਮੈਂਟੇਨ ਸਥਿਰਾਂਕ (Km) ਅਤੇ ਵੱਧ ਤੋਂ ਵੱਧ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦਰਾਂ (Vmax) ਵਰਗੇ ਗਤੀ ਮਾਪਦੰਡਾਂ ਨੂੰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨਾ ਸੰਭਵ ਹੈ।